Principio: La mayoría de las proteínas absorben en el UV a 280 nm. debido básicamente a grupos cromóforos de tirosina y triptofano. Si se considera que la cantidad de estos dos aminoácidos es siempre constante la absorbancia debe ser proporcional a la concentración de proteína.
Ventajas: Es el método más rápido: requiere de muy poca cantidad de proteína. El sulfato de amonio no interfiere mientras que en la mayoría de los métodos si existe interferencia. La muestra no se destruye y puede ser usada en otros análisis.
Limitaciones: Se puede hacer una corrección por presencia de ácidos nucleicos ya que estos tienen absorción máxima a 260 nm. Si se conoce la relación de absorción de la proteína a 280/260 nm es fácil distinguir la interferencia de ácidos nucleicos. Varía la cantidad de aromáticos entre proteínas.